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果树病毒病的检定方法有哪些?

(3)酶联免疫吸附法(ELISA法):原理是先将抗体吸附在凝胶皿凹穴壁上,再加入试料,然后加入酶标识的抗体,最后加入发色基质,若凹穴中有病毒存在,基质被分解而呈黄色。通过电气泳动得到的dsRNA的结果,就可以检定病毒和类病毒。果树病毒病的检定方法有哪些?经脱毒获得的无病毒母本树以及生产繁育的无病毒苗木,都必须定期进行病毒病的检定。其主要的方法有症状观察诊断法、指示植物法、酶联免疫吸附法(ELISA法)、电子显微镜法和核酸检出法。在果树病毒检定中仅是一种辅助手段。(1)症状诊断法:主要是根据病毒在果树上表现出的明显症状,用肉眼来诊断。(4)电子显微镜法:主要是依据显微镜下平素粒子的形态来检定病毒。叶片症状一般在初春幼叶上表现;果实症状一般在幼果期和成熟期表现。诊断时必须把握住最佳时期。本办法仅适用于非潜隐性病毒病的检定,如苹果花叶病、苹果锈果病、葡萄扇叶病、卷叶病等。我国苹果上的3种潜隐病毒常用的木本指示植物是:褪绿叶斑病毒,利用苏俄苹果检定;茎沟病毒利用弗吉尼亚小苹果检定;茎痘病毒利用弗吉尼亚小苹果及光辉苹果检定。该方法检测敏度高,可以把利用指示植物检定所需要的数月时间缩短为2~3天,并且一次可以检定大量材料。(2)指示植物法:因潜隐病毒在通常情况下不表现症状,难于识别,必须嫁接在对这类病毒敏感,能表现出典型症状的植物上,才能检测出来,这种植物就叫做指示植物。(5)核酸检出法:受病毒感染的植物中,含有各种不同的dsRNA,而建全植物中则没有

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