叶片培养

叶片培养可能是产生原球茎最有希望的方法,可取带腋芽的花梗,用水冲洗后,置于10%漂白粉溶液中,表面灭菌20分钟,除去苞叶,再在5%漂白液中灭菌3分钟,用无菌水冲洗干净,接种到培养基上培养,置于室温23~24℃和每日16小时500勒克斯光照条件下诱导产生原球茎后,进而分化出叶片。培养基可用VW,附加CM20%、蔗糖2%~3%、琼脂1%的培养基。或者不用CM而加6-苄基嘌呤(BA)5.0毫克/升也可以。然后取其展开叶片最上部先端、中央或基部,切成6~8毫米大小,接种于Kyoto改良培养基,加复合肥料3500毫克/升、肌醇100毫克/升、烟酸1毫克/升、盐酸硫胺素1毫克/升、萘乙酸(NAA)1毫克/升、腺嘌呤10毫克/升、BA10毫克/升,蔗糖改为20克/升,琼脂10克/升,置于25C恒温和每日16小时500勒克斯光照条件下培养,约经40~60天后即可得到原球茎,再经继代培养,即可获得原球状的球状体。继代培养既可用Kyoto培养基进行固体培养,也可用VW培养基加20%CM,并除去蔗糖进行液体振荡培养。形成的原球茎球状体只需在简单的培养基上进行静置培养,2~3个月后萌芽出叶,再转到添加10%香蕉汁的Kyoto培养基上,经数月后即可得到可移植的大苗。

(记者佚名)

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